提供世界一流的高靈敏度、高可靠性的Nano-LC-ESI-MS/MS蛋白質(zhì)分析鑒定技術。自2003年以來, 我們向世界各地的尖端科學研究機構提供了高質(zhì)量的全面的蛋白質(zhì)譜服務。我們的服務質(zhì)量也已從我們的國內(nèi)外客戶在國際一 流雜志上發(fā)表的論文中得到證實。
Label-free MS定量組學分析
1: 由于和代謝或化學標記無關,這個方法可用于任何蛋白質(zhì)樣品,包括原代細胞樣品,組織和血液樣品。
2:該方法結合三種水平的MS豐度特征(peptide count, spectral count and fragment-ion intensit)來消除重復的MS測量值之間的差異。它能夠在相同或者不同樣品中重復測定幾千種蛋白。
3:根據(jù)研究,該方法可以同時準確的檢測> 80%蛋白。
步驟:
1:根據(jù)樣品信息,我們將蛋白按照分子量、電荷、疏水性等性狀分成多個組分。常用的分離方法包括SDS-PAGE,SCX等色譜方法。蛋白的分組有利于樣品深度的分析和檢測到更多蛋白。
2:如果需要進行某一類蛋白組學分析,例如有特定修飾的肽段,我們需要進行標準的親和純化,純化過程包括:Trypsin水解和親和層析。通常IMAC方法用于純化磷酸化肽鏈,抗體經(jīng)常用來純化乙酰化或泛素化肽鏈,能夠有針對性的對翻譯后修飾的位點進行識別。由于親和純化后未經(jīng)修飾的肽鏈被去除,翻譯后修飾肽鏈的相對含量能夠測出。
3:獲得的LCMS數(shù)據(jù)輸入到我們的專有軟件程序中進行生物信息學分析。
分析包括:
i). 從MS / MS數(shù)據(jù)識別肽序列;
ii). 聚集相同的蛋白所有肽序列;
iii).從多個組分中聚集相同蛋白;
iv).計算每個蛋白質(zhì)的SNI和在原樣品中的相對豐度;
v).對于在進行比較的的幾組樣品中,如果有些蛋白的差異高于設置的標準,會對其進行差異分析來鑒別這些蛋白種類。
優(yōu)勢:
1:ProtTech 十二年質(zhì)譜檢測經(jīng)驗,品質(zhì)保證;
2:優(yōu)化了樣品處理步驟,最大程度保證蛋白信息的完整性;
3:專有的系統(tǒng)改進技術增加蛋白檢測的數(shù)量,提高了檢測的靈敏度。
4:ProTtech已開發(fā)了十幾種專有的分析軟件,已確保檢測結果的準確。
相關文獻:
The molecular mechanism of mediation of adsorbed serum proteins to endothelial cells adhesion and growth on biomaterials
D Yang, X Lü, Y Hong, T Xi, D Zhang - Biomaterials, 2013 - Elsevier
... the aim of this study is to systematic investigate the molecular mechanism of mediation ... Protein
samples were desalted by dialysis using membrane with a molecular weight cut off ... by
NanoLC-MS/MS peptide sequencing technology were performed in ProtTech, Inc., (Norristown ...